人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称:
通用名:人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)酶联免疫分析试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)水平。用纯化的人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)再与HRP标记的8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)浓度。
试剂盒组成
1 |
20倍浓缩洗涤液 |
30ml×1瓶 |
7 |
终止液 |
6ml×1瓶 |
2 |
酶标试剂 |
6ml×1瓶 |
8 |
标准品(90ng/L) |
0.5ml×1瓶 |
3 |
酶标包被板 |
12孔×8条 |
9 |
标准品稀释液 |
1.5ml×1瓶 |
4 |
样品稀释液 |
6ml×1瓶 |
10 |
说明书 |
1份 |
5 |
显色剂A液 |
6ml×1瓶 |
11 |
封板膜 |
2张 |
6 |
显色剂B液 |
6ml×1/瓶 |
12 |
密封袋 |
1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为60ng/L,40ng/L ,20ng/L,10ng/L, 5ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置
4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.
地 址: 上海市杨浦区政悦路500弄57号702 联系人: 王萍 电 话: 021-56076682 传 真: 021-56078580 Email:yhswbio@163.com
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