精品│翌圣ZymeEditor打造超高文库转化率T4 DNA Ligase
建库作为NGS测序的核心步骤，直接影响测序质量，文库转化率是评估文库质量的重要指标，高的文库转化率一定程度上意味着文库丰富度、测序数据均一性更好。常规T4 DNA Ligase催化DNA的 3’-OH 和接头的5’-磷酸基团之间形成磷酸二酯键完成接头连接，但此过程中会出现片段自连，从而减低文库转化率，影响文库丰富度与测序质量。翌圣ZymeEditor™酶改造平台对T4 DNA Ligase进行定向改造获得Hieff® 5' App T4 DNA Ligase（Cat#14960ES），该突变体只能以预苷化接头为底物进行接头连接，显著减少片段自连，提高文库转化率。
图1. NGS常规建库流程
产品特点
1、极低片段自连：只能以预腺苷化的接头为底物，极大降低片段自连。
2、超高接头连接效率：连接效率达95%以上。
3、严格质控：无切口酶、外切酶及RNase残留。
数据展示
图2. 以170 bp模式片段为底物连接效率检测
图3. 以300 bp模式片段为底物连接效率检测
图4. RNase残留检测 C：阴性对照
3、无切口酶及外切酶残留
将200 U Hieff® 5' App T4 DNA ligase与底物DNA孵育，琼脂糖凝胶电泳比较DNA谱带变化。结果显示翌圣Hieff® 5' App T4 DNA ligase无切口酶残留。
图5. 切口酶残留检测 C：阴性对照
将2000 U Hieff® 5' App T4 DNA ligase与底物DNA孵育，琼脂糖凝胶电泳比较DNA谱带变化。结果显示翌圣Hieff® 5' App T4 DNA ligase无外切酶残留。
图6. 外切酶残留检测 C：阴性对照
相关产品推荐
|
产品定位 |
产品名称 |
产品货号 |
|
末修加A |
UCF.ME® T4 DNA Polymerase (3 U/μL) |
14457ES |
|
T4 Polynucleotide kinase(10 U/μL) |
12902ES |
|
|
常规接头连接 |
Hieff® Quick T4 DNA Ligase |
10301ES |
|
预腺苷化接头连接 |
Hieff® 5' App T4 DNA ligase |
14960ES |
|
文库扩增 |
地 址： 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元 联系人： 李自转 电 话： 400-6111-883、021-34615995-8075 传 真： 021-34615995-188 Email：lizizhuan@yeasen.com
宿主gDNA、试剂背景核酸污染去除只需一款Thermolabile dsDNase！
(2024-12-20T00:00 浏览数:4782)
IVD冻干RDC，为分子诊断“量身定制”、领先“翌”步！
(2024-12-20T00:00 浏览数:6442)
看到就是赚到！mRNA药物研发及生产流程的质量安全控制策略全公开！
(2024-12-20T00:00 浏览数:5219)
巨噬细胞清除小课堂 | 第二课：肝脏
(2024-12-20T00:00 浏览数:6475)
干货 | 收藏夹吃灰系列之克隆典型案例分析
(2024-12-20T00:00 浏览数:3111)
解决方案 | 多重PCR建库技术多领域“竞”显身手！
(2024-12-20T00:00 浏览数:6452)
青出于蓝，更强更好用的qPCR Mix来啦！
(2024-12-19T00:00 浏览数:11751)
精品推荐 | 一步到位，IVD分子诊断RT-qPCR原料就选它！
(2024-12-19T00:00 浏览数:6710)
Nature子刊 | 南京大学沈萍萍团队发现维持巨噬细胞修复功能的调控新机制！
(2024-12-19T00:00 浏览数:11570)
翌圣生物低dsRNA T7 RNA聚合酶为mRNA应用的安全性增加一重保障！
(2024-12-11T00:00 浏览数:13910) |