酶切点位
5'-G↓GATCC-3'
3'-CCTAG↑G-5'
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
FuniCut™ BamHI | 15003ES76 | 500 T |
产品描述
FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。
产品组分
组分名称 | 产品规格 | |
15003-A | FuniCut™ BamHI | 500 μL |
10×FuniCut™ Buffer | 3×1 mL | |
15003-C | 10×FuniCut™ Color Buffer | 3×1 mL |
运输与保存方法
冰袋运输。-20°C保存,有效期2年。
酶活定义
37°C下,在20 μL反应体系中,1 μL酶能够在15 min内完全消化1 μg λDNA所需的酶。
识别位置
5'-G↓GATCC-3'
3'-CCTAG↑G-5'
推荐反应条件
1× FuniCut™ 缓冲液;
最适37°C孵育。
失活条件
不可热失活,请使用酚氯仿抽提或柱纯化。
注意事项
1)3 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性;
2)不可热失活;
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作;
4)本产品仅作科研用途!
质量控制
1. 功能活性检测:最适反应温度下,在20 μL反应体系中,1 μL酶能够在15 min内完全消化1 μg λDNA。
2. 超长时间孵育检测:最适反应温度下,将1 μL酶与1 μg λDNA共孵育3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,但延长孵育时间可能出现星号活性。
3. 酶切-连接-再酶切检测:最适反应温度下,使用1 μL酶消化底物,回收酶切产物,在22°C下使用适量T4 DNA连接酶可以将酶切产物重新连接,将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
4. 非特异性内切酶活性检测:最适反应温度下,将1 μL酶与1 μg超螺旋质粒DNA共同孵育4 h后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,质粒DNA仍然处于超螺旋状态。
5. 蓝白斑检测:将含有单一lacZα基因的载体以1 μL酶消化,重新连接后转化入大肠杆菌感受态细胞,涂布在含有对应抗生素、IPTG和X-gal的LB培养基平板上。连接正确的产物会生长出蓝色菌落,而连接错误(即DNA末端切口不完整)的产物将得到白色菌落。对于FuniCut™系列限制酶而言,白色菌落比例应小于1%。
使用方法
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地 址: 北京市海淀区创客小镇
联系人: 魏
电 话: 4008883135
传 真: 01057187533
Email:customer@bestopbio.com;3007606172@qq.com
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