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培养基的灭菌原理及方法

作者:上海拜力生物科技有限公司 2011-10-26T00:00 (访问量:9365)

所谓灭菌就是杀死一切微生物,包括微生物的营养体和芽孢,这一概念不同于消毒。后者是指消灭一切致病微生物(病原体)。在发酵生产中为什么要灭菌呢?主要有以下几点原因:如不灭菌,会使生物反应的基质或产物,因杂菌的消耗而损失,造成生产能力的下降;杂菌也会产生代谢产物,这就使产物的提取更加困难,造成得率降低,产品质量下降;有些杂菌会分解产物,使生产失败;杂菌大量繁殖后,会改变反应液的pH值,使反应异常;如果发生噬菌体污染,生产菌细胞将被裂解,使生产失败。一、培养基灭菌的原理和方法:灭菌的方法很多,在实验室可以使用干热灭菌、对于环境可以使用化学试剂灭菌,但化学试剂的灭菌方法有很大的限制。在工业生产中,对于培养基、管道、设备的灭菌,通常采用蒸汽加热到一定的温度,并保温一段时间的灭菌方法,称之为湿热灭菌。湿热灭菌的显著优点是:使用方便,无污染,而且其冷凝水可以直接冷凝在培养基中,也可以通过管道排出。灭菌的原理在这里先讲几个概念:①致死温度:杀死微生物的极限温度。②致死时间:在致死温度下,杀死全部微生物所需要的时间。③微生物的热阻:表示微生物对热的抵抗能力,即指微生物在某一特定条件下(主要是温度)的致死时间。其对热的抵抗能力越大,可以理解为热阻越大,衡量不同的微生物对热的抵抗能力的大小,可以使用相对热阻的概念。④相对热阻:某一微生物在某一特定条件下的致死时间与另一微生物在相同条件下的致死时间之比。例如:芽孢/大肠杆菌=3000000/1;病毒/大肠杆菌=1—5/1等。
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